组培室常用设备的使用方法

组培室超净工作台的使用：超净工作台有水平风和垂直风、单人和双人之分，主要由三相电机、鼓风机、初过滤器和超过滤器、挡板、工作台面等几部分构成。通过电机带动，鼓风机将空气通过特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流（除去了大于0.3μm的尘埃、真菌等），在工作台面制造无菌区，从而防止附近空气可能引起的污染。一般设定20～30m/min的风速不会妨碍采用酒精灯对器械的灭菌。使用方法，接通电源；打开台内紫外线灯杀菌30min；30min后关紫外线灯，打开风机20min；打开照明灯，准备接种。

注意事项：新安装的或长期未使用的超净工作台，使用前须对超净工作台和周围环境使用超净真空吸尘器或不产生纤维的工具进行认真的清洁工作。工作台面上不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。禁止在工作台面上记录，工作时应须尽量避免有明显扰乱气流的动作。定期（一般为2个月）用热球式风速仪测量工作区风速，如发现不符合技术要求，则可调大风机的供电电压。

便携式压力灭菌锅的使用：构造与工作原理便携式压力灭菌锅由锅体、内锅、电热管、搁帘、锅盖、压力表、橡胶密封垫、放气阀、安全阀等构成。其工作原理是利用所产生的高压湿热水蒸气（温度为121～123℃，压力为0.10～0.15MPa）来达到灭菌的目的。使用方法，加水装锅，打开锅盖，加入清水至超过锅底搁帘1cm左右，然后放上内锅，装入待灭菌物品，盖上锅盖，对角线拧紧螺栓。通电升压，排冷空气：接通电源，使灭菌锅开始工作。当压力为0.05MPa时，打开放气阀，排放冷气，待指针回零后（根据具体情况，可反复2～3次排放冷气），关闭放气阀，使灭菌锅升温加压。保压：当压力达到0.10MPa时，开始计时，使锅内蒸汽压力保持0.10～0.15MPa的范围，维持15～30min的灭菌时间。降压排气：灭菌结束后断开电源，让锅内压力自然下降，当指针归零后打开放气阀，排放余气。出锅冷却：当压力表指针为零时，打开放气阀，手戴隔热手套，开锅取出灭菌物品。

注意事项：装锅时严禁堵塞安全阀的出气孔，锅内须留出空位，以保证水蒸气畅通。

采用耐热玻璃瓶灌装待灭菌液体，液体体积不超过容器体积的3/4，切勿使用未打孔的橡胶或软木瓶塞。灭菌结束后，不可久不放气，这样会引起培养基成分变化，以至培养基无法凝固。培养基灭菌结束后，也不能马上打开灭菌锅；待出锅后的培养基凝固后再转移。对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以提高锅内压力，缩短灭菌时间，而对易引起化学成分变化的物体，则要严格控制灭菌温度和灭菌时间。防止灭菌时间过长带来培养基中的成分和pH等发生不利于离体材料培养的变化，灭菌温度不足则会造成灭菌不彻底，引起接种后大面积污染。委托专业人员或厂家定期检修压力表，如果压力表的指示不正确或不能回复零位，应及时更换新表。平时应保持设备清洁和干燥，橡胶密封垫使用日久会老化，应定期更换。安全阀应定期检查其可靠性，当工作压力超过0.165MPa时，需要更换合格的安全阀。中净环球净化可提供洁净车间、无菌室等的咨询、规划、设计、施工、安装、改造等配套服务。

pH计（PHS-3C型）的使用：仪器构造精密pH计主要由控制与处理系统和电极两部分构成。在主体上有液晶显示屏、调节与控制按钮。使用方法，开机前准备，先将电极梗旋入电极插座，调节电极夹至适当位置，再将复合电极夹在电极夹上，拉下电极前端的电极套，用蒸馏水清洗电极，用滤纸吸干电极表面附着的水分。开机：接通电源线，按下电源开关，设备预热30min后进行标定。标定：仪器使用前标定设备。如果仪器连续使用则每天要标定1次。标定方法如下：a.在测量电极插座处拔去短路插座，换上复合电极。b.将选择开关旋钮调到pH档，调节温度补偿旋钮，使旋钮白线对准溶液温度值，斜率调节旋钮顺时针旋到底（即调到100%位置）。c.将清洗过的电极插入pH 6.86的缓冲溶液，调节定位调节旋钮，使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温度下的pH值一致（如用混合磷酸，定位温度为10℃时，pH选择6.92）。d.再将蒸馏水清洗过的电极插入pH 4.00（或pH 9.18）的标准溶液中，调节斜率旋钮，使仪器显示读数与该缓冲溶液当时温度下的pH值一致。e.重复c、d两步操作，直到不用再调节定位或斜率两个调节旋钮为止，标定完成。测量：当被测溶液与标定溶液的温度相同时，测量时先用蒸馏水清洗电极头部，再用被测溶液清洗1次，然后将电极浸入被测溶液中，用玻璃棒搅拌溶液，使溶液均匀，在显示屏上读出溶液的pH值。当被测溶液和标定溶液温度不相同时，在电极清洗后，先用温度计测出被测溶液的温度值，调节温度调节旋钮，使白线对准被测溶液的温度值，然后再测定溶液的pH值。

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